植物生理学实验指导高俊凤
❶ 过氧化物酶溶液配制
http://www.bbioo.com/bio101/2006/7439.htm
❷ 新版的《植物生理学实验指导》,邹琦主编的,中国农业出版社,要电子版的.
可以在超星里下载啊!
❸ 求植物生理学实验书
植物生理学实验指导书》是1988年中央广播电视大学出版社出版的图书,作者是柳青松内。
本书内容包括容植物生理学实验及植物生理学复习指导。在实验内容上,力求选择目前植物生理学中常用的实验技术;做到室内常规分析和时间快速测定相结合,验证性与定量性实验相结合;对于学员,要求在教师的指导下,亲自动手,独立完成实验的各个环节,只有在独立完成实验的全过程后,才能为今后开展普及性的科学实验或进行课题研究打下基础。植物生理学复习指导的编写,力求通俗易懂、突出重点,为学员复习教材内容、巩固课堂知识服务,并有重点地选择教材每章后的思考题三至五题进行解答,为学员的答题起开导作用。
❹ 叶绿体色素的提取和分离试验中的提取液和层析液的区别
提取液和层析液都是有机溶剂,都能溶解色素,提取液是提取色素,层析液是分离色素
,成分有区别,提取液一般用丙酮,层析液是由20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成。胡萝卜素在层析液里的溶解度大。
❺ 您好,能否提供SOD,CAT,POD,MDA的测定方法和具体操作时的注意事项啊
采用NBT法测定SOD酶活性。在黑暗条件下,向小烧杯中分别加入:62.5mmol/l pH7.8磷酸缓冲液4ml、/ldl-甲硫氨酸0.2ml、3µmol/LEDTA0.1ml、1.125mmol/l NBT0.2ml、60µmol/l核黄素0.2mL,上述提取出的各处理的酶液0.05mL,以不加NBT和酶液但用缓冲液代替的混合液作为校零对照,测最大值时只不加入酶液但用缓冲液补齐,加完所有的物质后,在人工培养箱中用日光灯光照25分钟后,用分光光度计在波长560nm的情况下测定各管的OD值。以能抑制反应50%的酶量为一个SOD单位,其活力可由下面的公式计算:
SOD活力(U/mg蛋白)= (对照管吸光度-测定管吸光度)/对照管吸光度/
[(50%)×加入粗酶液中的蛋白质含量(mg)]
3过氧化物酶(POD)的测定:
0.05mol/L磷酸缓冲溶液(PBS)(pH=7.0)溶液的配制:10.9251g Na2HPO4•12H2O + 3.042975g NaH2PO4•2H2O,定容到1000ml。
0.3%H2O2溶液的配制:吸2.5ml 30%H2O2,用0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS)定容到250ml。
0.2%愈创木酚溶液的配制:称0.5g愈创木酚,用0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS)定容到250ml。
2ml 0.3%H2O2溶液 + 0.95ml 0.2%愈创木酚溶液 + 1ml 0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS) + 0.02ml??(原来为0.01)酶液(根加0.05ml酶液)(对照用0.05mol/L磷酸缓冲溶液代替酶液)(做三个重复),记录470nm处OD降低速度。将每分钟OD增加0.01定义为1个活力单位。(参考陈建勋,王晓峰主编的《植物生理学实验指导》P121)
比色时加酶液,混合后即刻计时。
04级 采用愈创木酚法测定POD酶活性。取光径1cm的比色杯2只,一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液1ml作为较零对照,另一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液0.9ml,上述提取得酶液0.1ml,立即开启秒表计时,于分光光度计470nm波长下测定OD值,每隔一分钟读数一次,以每分钟OD变化值表示酶活性大小,即以△OD470/min•mg蛋白质(或鲜重g)表示。