色譜分析論文

⑴ 液相色譜儀怎麼分析,該寫些什麼 論文中要的

色譜圖，其實簡單地講，是一個橫坐標是時間，縱坐標是電信號的二維圖譜。

你這張是色譜圖的坐標，但是並沒有出圖。

這個才是圖譜。

和實驗相關的參數：

1、保留時間

如果使用同樣的色譜柱，同樣的流動相，分析同樣的樣品，那麼這個樣品的保留時間，應該是固定的。不同保留時間的色譜峰，應該表現出的是不同的物質。如果你跑的是反相色譜，那麼色譜峰越靠後，它對應物質的極性也就越小。

比如這一針，樣品中一共有八個峰，那麼對應的應該是八個物質。比如說，你手上有正十六烷的試劑，進樣分析是15.6min左右，那麼，你的實驗條件下，15.6min左右的色譜峰就應該是正十六烷。或者說，正十六烷在該實驗條件下的保留時間是15.6min。

2、峰面積

這是你在色譜圖中可以讀出來的參數，你的液相色譜工作站應該是島津的軟體，上面應該有保留時間、峰高、峰面積的參數。在同一個色譜條件下，同一個物質的濃度和峰面積是成正比的。也就是說，如果你配製1.0mg/ml的正十六烷，進樣後峰面積是10000，那麼，你配製0.5mg/ml的正十六烷，進樣後峰面積差不多就是5000。

3、波長

同一樣品，同一方法，同一色譜柱，在不同波長的峰面積是不同的。一個物質指在某些特殊波長下有吸收。比如一個物質在210nm和254nm處有吸收。那麼波長在280nm處可能無法檢出該物質。所以一個實驗方法開始時要進行波長掃描。

這個是因為液相配置的檢測器大多都是紫外檢測器的緣故。

基本情況就是這樣，具體的東西，你要根據你的實驗數據以及研究課題自己來寫。

⑵ 高效液相色譜法心得體會論文

高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送（最高輸送壓力可達4.9??107Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高於經典液相色譜（每米塔板數可達幾萬或幾十萬）；同時柱後連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測。
特點

1．高壓：液相色譜法以液體為流動相（稱為載液），液體流經色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地通過色譜柱，必須對載液施加高壓。一般可達150～350×105Pa。
2. 高速：流動相在柱內的流速較經典色譜快得多，一般可達1～10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多，一般少於 1h 。
3. 高效：近來研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高。
4.高靈敏度：高效液相色譜已廣泛採用高靈敏度的檢測器，進一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測器靈敏度可達10-11g。另外，用樣量小，一般幾個微升。
5.適應范圍寬：氣相色譜法與高效液相色譜法的比較：氣相色譜法雖具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優點，但是受技術條件的限制，沸點太高的物質或熱穩定性差的物質都難於應用氣相色譜法進行分析。而高效液相色譜法，只要求試樣能製成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發性的限制。對於高沸點、熱穩定性差、相對分子量大（大於 400 以上）的有機物（這些物質幾乎佔有機物總數的 75% ～ 80% ）原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。 據統計，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約佔20%，而能用液相色譜分析的約佔70～80%。

高效液相色譜按其固定相的性質可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對應的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏、快速、解析度高、重復性好，且須在色譜儀中進行。
高效液相色譜法的主要類型及其分離原理
根據分離機制的不同，高效液相色譜法可分為下述幾種主要類型：

1 ．液 — 液分配色譜法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography)

流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱，溶質在兩相間進行分配。達到平衡時，服從於下式：

式中，cs—溶質在固定相中濃度；cm--溶質在流動相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決於K，K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動相對K影響不大，LLPC流動相對K影響較大。

a. 正相液 — 液分配色譜法(Normal Phase liquid Chromatography): 流動相的極性小於固定液的極性。

b. 反相液 — 液分配色譜法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流動相的極性大於固定液的極性。

c. 液 — 液分配色譜法的缺點：盡管流動相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動相中仍有微量溶解；流動相通過色譜柱時的機械沖擊力，會造成固定液流失。上世紀70年代末發展的化學鍵合固定相（見後），可克服上述缺點。現在應用很廣泛（70~80%）。

2 ．液 — 固色譜法

流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據物質吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是：當試樣進入色譜柱時，溶質分子 (X) 和溶劑分子(S)對吸附劑表面活性中心發生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是S），可表示如下：

Xm + nSa ====== Xa + nSm

式中：Xm--流動相中的溶質分子；Sa--固定相中的溶劑分子；Xa--固定相中的溶質分子；Sm--流動相中的溶劑分子。

當吸附競爭反應達平衡時：

K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]

式中：K為吸附平衡常數。[討論：K越大，保留值越大。]

3 ．離子交換色譜法(Ion-exchange Chromatography)

IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基於離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換，依據這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。

以陰離子交換劑為例，其交換過程可表示如下：

X-(溶劑中) + (樹脂-R4N+Cl-)=== (樹脂-R4N+ X-) + Cl- (溶劑中)

當交換達平衡時：

KX=[-R4N+ X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-]

分配系數為：

DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX [-R4N+Cl-]/[Cl-]

[討論：DX與保留值的關系]

凡是在溶劑中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法來進行分離。

4 ．離子對色譜法(Ion Pair Chromatography)

離子對色譜法是將一種 ( 或多種 ) 與溶質分子電荷相反的離子 ( 稱為對離子或反離子 ) 加到流動相或固定相中，使其與溶質離子結合形成疏水型離子對化合物，從而控制溶質離子的保留行為。其原理可用下式表示：

X+水相 + Y-水相 === X+Y-有機相

式中：X+水相--流動相中待分離的有機離子（也可是陽離子）；Y-水相--流動相中帶相反電荷的離子對（如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等）；X+Y---形成的離子對化合物。

當達平衡時：

KXY = [X+Y-]有機相/[ X+]水相[Y-]水相

根據定義，分配系數為：

DX= [X+Y-]有機相/[ X+]水相= KXY [Y-]水相

[討論：DX與保留值的關系]

離子對色譜法(特別是反相)發解決了以往難以分離的混合物的分離問題，諸如酸、鹼和離子、非離子混合物，特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物鹼以及葯物等分離。

5 ．離子色譜法(Ion Chromatography)

用離子交換樹脂為固定相，電解質溶液為流動相。以電導檢測器為通用檢測器，為消除流動相中強電解質背景離子對電導檢測器的干擾，設置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。

以陰離子交換樹脂（R-OH）作固定相，分離陰離子（如Br-）為例。當待測陰離子Br-隨流動相（NaOH）進入色譜柱時，發生如下交換反應（洗脫反應為交換反應的逆過程）：

抑制柱上發生的反應：

R-H+ + Na+OH- === R-Na+ + H2O

R-H+ + Na+Br- === R-Na+ + H+Br-

可見，通過抑制柱將洗脫液轉變成了電導值很小的水，消除了本底電導的影響；試樣陰離子Br-則被轉化成了相應的酸H+Br-，可用電導法靈敏的檢測。

離子色譜法是溶液中陰離子分析的最佳方法。也可用於陽離子分析。
6 ．空間排阻色譜法(Steric Exclusion Chromatography)

空間排阻色譜法以凝膠 (gel) 為固定相。它類似於分子篩的作用，但凝膠的孔徑比分子篩要大得多，一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離，而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱後，隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻，因此就直接通過柱子，首先在色譜圖上出現，一些很小的分子可以進入所有膠孔並滲透到顆粒中，這些組分在柱上的保留值最大，在色譜圖上最後出現。

氣相色譜法（gas chromatography 簡稱GC）是色譜法的一種。色譜法中有兩個相，一個相是流動相，另一個相是固定相。如果用液體作流動相，就叫液相色譜，用氣體作流動相，就叫氣相色譜。
氣相色譜法由於所用的固定相不同，可以分為兩種，用固體吸附劑作固定相的叫氣固色譜，用塗有固定液的擔體作固定相的叫氣液色譜。
按色譜分離原理來分，氣相色譜法亦可分為吸附色譜和分配色譜兩類，在氣固色譜中，固定相為吸附劑，氣固色譜屬於吸附色譜，氣液色譜屬於分配色譜。
按色譜操作形式來分，氣相色譜屬於柱色譜，根據所使用的色譜柱粗細不同，可分為一般填充柱和毛細管柱兩類。一般填充柱是將固定相裝在一根玻璃或金屬的管中，管內徑為2～6mm。毛細管柱則又可分為空心毛細管柱和填充毛細管柱兩種。空心毛細管柱是將固定液直接塗在內徑只有0.1～0.5mm的玻璃或金屬毛細管的內壁上，填充毛細管柱是近幾年才發展起來的，它是將某些多孔性固體顆粒裝入厚壁玻管中，然後加熱拉製成毛細管，一般內徑為0.25～0.5mm。

⑶ 誰懂高效液相色譜法原理的，寫畢業論文需要用此法來分析，可是對這個不懂啊。求求大家啦

去「儀器信息網」上學學，上面資料很多，求人不如求己！

⑷ 阿莫西林的含量測定的論文·！用色譜法來測定·！

阿莫西林膠囊
阿莫西林膠囊 阿莫仙 強必林

拼音名：Amoxilin Jiaonang

英文名：Amoxicillin Capsules

書頁號：2000年版二部－339

本品含阿莫西林(C16H19N3O5S) 應為標示量的90.0％～110.0 ％。

【鑒別】 取本品的內容物，照阿莫西林項下的鑒別(1)項試驗，顯相同的結果。 【檢查】 水分 取本品的內容物，照水分測定法（附錄Ⅷ M第一法A）測定，含水

分不得過16.0％。

溶出度 取本品，照溶出度測定法（附錄Ⅹ C第一法），以水為溶劑，轉速為每分

鍾100 轉，依法操作，45分鍾時，取溶液適量，濾過，精密量取續濾液適量，用水稀釋

成每1ml 中約含130μg的溶液；另取裝量差異項下的內容物，混合均勻，精密稱取適量

（約相當於1粒的平均裝量）按標示量加水溶解並稀釋成每1ml 中約含130μg的溶液。取

上述兩種溶液，照分光光度法（附錄Ⅳ A），在272nm 的波長處分別測定吸收度，按二者

吸收度的比值計算每粒的溶出量。限度為80％，應符合規定。

其他 應符合膠囊劑項下有關的各項規定（附錄Ⅰ E）。

【含量測定】 取裝量差異項下的內容物，混合均勻，精密稱取適量，加磷酸鹽緩沖液

（PH5.0）溶解並稀釋成每1ml中約含0.6mg的溶液，濾過，取續濾液，照阿莫西林項下的方法

測定。

【類別】 同阿莫西林。

【規格】 按C16H19N3O5S 計算 (1) 0.125g (2) 0.25g

【貯藏】 遮光，密封保存。
阿莫西林分散片
通用名： 阿莫西林分散片
曾用名：
英文名： AMOXICILLIN DISPERSIBLE TABLETS
拼音名： AMOXILIN FENSAN PIAN
葯品類別： 青黴素類
適應症： 適用於對本品敏感細菌所致的呼吸道感染、泌尿道感染、胃腸道感染、皮膚和軟組織感染。
性狀： 白色或類白色片。
葯理毒理： 廣譜半合成青黴素，對於溶血性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎球菌、青黴素 G敏感金黃色葡萄菌、淋球菌、流感嗜血桿菌、腸球菌、沙門氏菌、傷寒桿菌及變形桿菌等均有抗菌作用。對產生青黴素酶的金黃色葡萄菌無作用。細菌對本品和氨苄青黴素有完全交叉耐葯性。
葯代動力學： 阿莫西林口服給葯後，75%～90%由胃腸道迅速吸收，胃內食物的存在不會明顯地影響葯物的吸收。本品0.5g口服血葯濃度的達峰時間(tmax)約為(1.28±0.17) 小時，血葯濃度峰值(Cmax)約為(7.07±1.26)μg/ml。本品吸收後能很好地滲入腦脊液、中耳液、唾液、支氣管分泌液、扁桃體、增殖腺、膽汁、骨髓及羊水等，並能迅速分布到腎、肺、肝等重要器官。本品在組織體液中的濃度大大超過了其在體內的最低抑菌濃度。本品主要通過腎小球濾過和腎小管分泌以原形自尿中排出，8小時尿中排泄可達50%～70%，另有20%以青黴噻唑酸自尿中排泄。丙磺舒可延緩本品經腎排泄。
用法用量： 本品既可直接用水吞服，也可放入牛奶或果汁中，攪拌至混懸狀態後服用。口服： 1.成人一次0.5～1g，一日3～4次；小兒每日按體重50～100mg/kg，分3～ 4次服用。 2.治療無並發症的急性尿路感染可予以單次口服3g即可，也可於10～12小時後再增加一次3g劑量。單次3g劑量也可用以預防感染性心內膜炎或治療淋病，前者於口腔內手術(如拔牙)前1小時給予，後者常加用丙磺舒1g。
不良反應： 少數患者可出現惡心、嘔吐、食慾減退、腹瀉等消化道反應，一般不影響治療。偶可出現皮疹、斑疹、紫癜等，應立即停葯。
禁忌症： 對青黴素類葯物過敏者禁用。
注意事項： 1.用葯前必須進行青黴素鈉皮內敏感試驗，陽性反應者禁用。 2.伴有單核細胞增多和淋巴細胞增多的患者，出現皮疹的機會多一些。 3.與青黴素類和頭孢菌素類之間存在交叉過敏性和交叉耐葯性。 4.類似其它廣譜抗生素，有可能發生由白念珠菌等非敏感微生物引起的二重感染，尤其是慢性病患者和自身免疫功能失調者。
孕婦及哺乳期婦女用葯： 尚不明確。
兒童用葯：
老年患者用葯：
葯物相互作用： 尚不明確。
葯物過量：
貯藏： 遮光，密閉，在陰涼乾燥處保存。

⑸ 儀器分析里的色譜法的論文。

儀器分析的色譜法有很多，什麼離子色譜，氣相色譜，液相色譜等等，

⑹ 求高人詳解色譜論文

將數據放入EXCEL表中，用插入-圖表中，選散點圖，excel會自動幫你得出線性方程的
，相關系數必須要高於0.99，才說明這個線性方程是可用的

⑺ 誰幫我寫個關於色譜的論文

色譜法
維基網路，自由的網路全書
(重定向自色譜)
跳轉到： 導航, 搜索

本條目是新條目推薦候選之一，如果您認為它有資格列入首頁的「你知道嗎？」單元，讓更多讀者注意到，歡迎投票支持。如果您心中尚有條目想推薦，也歡迎提出。關於入選文章的資格與推薦規則，請參閱推薦規則。

色譜法又稱色譜分析、色譜分析法、層析法，是一種分離和分析方法，在分析化學、有機化學、生物化學等領域有著非常廣泛的應用。色譜法利用不同物質在不同相態的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進行洗脫，混合物中不同的物質會以不同的速度沿固定相移動，最終達到分離的效果。色譜法起源於20世紀初，1950年代之後飛速發展，並發展出一個獨立的三級學科——色譜學。歷史上曾經先後有兩位化學家因為在色譜領域的突出貢獻而獲得諾貝爾化學獎，此外色譜分析方法還在12項獲得諾貝爾化學獎的研究工作中起到關鍵作用。
目錄
[隱藏]

* 1 歷史
o 1.1 色譜的起源
o 1.2 分配色譜的出現和色譜方法的普及
o 1.3 氣相色譜和色譜理論的出現
o 1.4 高效液相色譜
* 2 原理
o 2.1 吸附色譜
o 2.2 分配色譜
o 2.3 離子交換色譜
o 2.4 凝膠色譜
* 3 色譜理論
o 3.1 關於保留時間的理論
o 3.2 基於熱力學的塔板理論
o 3.3 基於動力學的Van Deemter方程
* 4 基本技術和方法
* 5 應用
* 6 發展方向
o 6.1 新固定相的研究
o 6.2 檢測方法的研究
o 6.3 專家系統
o 6.4 色譜新方法
* 7 參見

[編輯]

歷史
[編輯]

色譜的起源

色譜法起源於20世紀初，1906年俄國植物學家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管，以石油醚洗脫植物色素的提取液，經過一段時間洗脫之後，植物色素在碳酸鈣柱中實現分離，由一條色帶分散為數條平行的色帶。由於這一實驗將混合的植物色素分離為不同的色帶，因此茨維特將這種方法命名為Хроматография，這個單詞最終被英語等拼音語言接受，成為色譜法的名稱。漢語中的色譜也是對這個單詞的意譯。

茨維特並非著名科學家，他對色譜的研究以俄語發表在俄國的學術雜志之後不久，第一次世界大戰爆發，歐洲正常的學術交流被迫終止。這些因素使得色譜法問世後十餘年間不為學術界所知，直到1931年德國柏林威廉皇帝研究所的庫恩將茨維特的方法應用於葉紅素和葉黃素的研究，庫恩的研究獲得了廣泛的承認，也讓科學界接受了色譜法，此後的一段時間內，以氧化鋁為固定相的色譜法在有色物質的分離中取得了廣泛的應用，這就是今天的吸附色譜。
[編輯]

分配色譜的出現和色譜方法的普及
薄層色譜分離列印機黑色油墨的組成
放大
薄層色譜分離列印機黑色油墨的組成

1938年阿切爾·約翰·波特·馬丁和理查德·勞倫斯·米林頓·辛格准備利用氨基酸在水和有機溶劑中的溶解度差異分離不同種類的氨基酸，馬丁早期曾經設計了逆流萃取系統以分離維生素，馬丁和辛格准備用兩種逆向流動的溶劑分離氨基酸，但是沒有獲得成功。後來他們將水吸附在固相的硅膠上，以氯仿沖洗，成功地分離了氨基酸，這就是現在常用的分配色譜。在獲得成功之後，馬丁和辛格的方法被廣泛應用於各種有機物的分離。1943年馬丁以及辛格又發明了在蒸汽飽和環境下進行的紙色譜法。
[編輯]

氣相色譜和色譜理論的出現

1952年馬丁和詹姆斯提出用氣體作為流動相進行色譜分離的想法，他們用硅藻土吸附的硅酮油作為固定相，用氮氣作為流動相分離了若干種小分子量揮發性有機酸。

氣相色譜的出現使色譜技術從最初的定性分離手段進一步演化為具有分離功能的定量測定手段，並且極大的刺激了色譜技術和理論的發展。相比於早期的液相色譜，以氣體為流動相的色譜對設備的要求更高，這促進了色譜技術的機械化、標准化和自動化；氣相色譜需要特殊和更靈敏的檢測裝置，這促進了檢測器的開發；而氣相色譜的標准化又使得色譜學理論得以形成色譜學理論中有著重要地位的塔板理論和Van Deemter方程，以及保留時間、保留指數、峰寬等概念都是在研究氣相色譜行為的過程中形成的。
[編輯]

高效液相色譜

1960年代，為了分離蛋白質、核酸等不易汽化的大分子物質，氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一台高效液相色譜儀，開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數，以高壓驅動流動相，使得經典液相色譜需要數日乃至數月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鍾內完成。

1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現代實踐》一書，標志著高效液相色譜法 (HPLC)正式建立。在此後的時間里，高效液相色譜成為最為常用的分離和檢測手段，在有機化學、生物化學、醫學、葯物開發與檢測、化工、食品科學、環境監測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應用。高效液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料、檢測技術、數據處理技術以及色譜理論的發展。
[編輯]

原理

色譜過程的本質是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質在兩相之間的分配會不同，這使其隨流動相運動速度各不相同，隨著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據物質的分離機制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。
[編輯]

吸附色譜

吸附色譜利用固定相吸附中西對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離，吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程

吸附色譜的分配系數表達式如下：

K_a =\frac{[X_a]}{[X_m]}

其中[Xa]表示被吸附於固定相活性中心的組分分子含量，[Xm]表示游離於流動相中的組分分子含量。分配系數對於計算待分離物質組分的保留時間有很重要的意義。
[編輯]

分配色譜

分配色譜利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑，依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布於色譜柱或者擔體表面。分配色譜過程本質上是組分分子在固定想和流動相之間不斷達到溶解平衡的過程。

分配色譜的狹義分配系數表達式如下：

K=\frac{C_s}{C_m}=\frac{X_s/V_s}{X_m/V_m}

式中Cs代表組分分子在固定相液體中的溶解度，Cm代表組分分子在流動相中的溶解度。
[編輯]

離子交換色譜

離子交換色譜利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力詫異來實現分離。離子交換色譜的固定相一般為離子交換樹脂，樹脂分子結構中存在許多可以電離的活性中心，待分離組分中的離子會與這些活性中心發生離子交換，形成離子交換平衡，從而在流動相與固定相之間形成分配。固定相的固有離子與待分離組分中的離子之間相互爭奪固定相中的離子交換中心，並隨著流動相的運動而運動，最終實現分離。

離子交換色譜的分配系數又叫做選擇系數，其表達式為：

K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}

其中[RX + ]表示與離子交換樹脂活性中心結合的離子濃度，[X + ]表示游離於流動相中的離子濃度。
[編輯]

凝膠色譜

凝膠色譜的原理比較特殊，類似於分子篩。待分離組分在進入凝膠色譜後，會依據分子量的不同，進入或者不進入固定相凝膠的孔隙中，不能進入凝膠孔隙的分子會很快隨流動相洗脫，而能夠進入凝膠孔隙的分子則需要更長時間的沖洗才能夠流出固定相，從而實現了根據分子量差異對各組分的分離。調整固定相使用的凝膠的交聯度可以調整凝膠孔隙的大小；改變流動相的溶劑組成會改變固定相凝膠的溶漲狀態，進而改變孔隙的大小，獲得不同的分離效果。
[編輯]

色譜理論
[編輯]

關於保留時間的理論

保留時間是樣品從進入色譜柱到流出色譜柱所需要的時間，不同的物質在不同的色譜柱上以不同的流動相洗脫會有不同的保留時間，因此保留時間是色譜分析法比較重要的參數之一。

保留時間由物質在色譜中的分配系數決定：

tR = t0(1 + KVs / Vm)

式中tR表示某物質的保留時間，t0是色譜系統的死時間，即流動相進入色譜柱到流出色譜柱的時間，這個時間由色譜柱的孔隙、流動相的流速等因素決定。K為分配系數，VsVm表示固定相和流動相的體積。這個公式又叫做色譜過程方程，是色譜學最基本的公式之一。

在薄層色譜中沒有樣品進入和流出固定相的過程，因此人們用比移值標示物質的色譜行為。比移值是一個與保留時間相對應的概念，它是樣品點在色譜過程中移動的距離與流動相前沿移動距離的比值。與保留時間一樣，比移值也由物質在色譜中的分配系數決定：

R_f=\frac{V_m}{V_m+KV_s}

其中Rf是比移值，K表示色譜分配系數，VsVm表示固定相和流動相的體積。
[編輯]

基於熱力學的塔板理論

塔板理論是色譜學的基礎理論，塔板理論將色譜柱看作一個分餾塔，待分離組分在分餾塔的塔板間移動，在每一個塔板內組分分子在固定相和流動相之間形成平衡，隨著流動相的流動，組分分子不斷從一個塔板移動到下一個塔板，並不斷形成新的平衡。一個色譜柱的塔板數越多，則其分離效果就越好。

根據塔板理論，待分離組分流出色譜柱時的濃度沿時間呈現二項式分布，當色譜柱的塔板數很高的時候，二項式分布趨於正態分布。則流出曲線上組分濃度與時間的關系可以表示為：

C_t=\frac{C_0}{\sigma\sqrt{2\pi}} e^{-\frac{(t-t_R)^2}{2\sigma^2}}

這一方程稱作流出曲線方程，式中Ct為t時刻的組分濃度；C0為組分總濃度，即峰面積；σ為半峰寬，即正態分布的標准差；tR為組分的保留時間。

根據流出曲線方程人們定義色譜柱的理論塔板高度為單位柱長度的色譜峰方差：

H=\frac{\sigma^2}{L}

理論塔板高度越低，在單位長度色譜柱中就有越高的塔板數，則分離效果就越好。決定理論塔板高度的因素有：固定相的材質、色譜柱的均勻程度、流動相的理化性質以及流動相的流速等。

塔板理論是基於熱力學近似的理論，在真實的色譜柱中並不存在一片片相互隔離的塔板，也不能完全滿足塔板理論的前提假設。如塔板理論認為物質組分能夠迅速在流動相和固定相之間建立平衡，還認為物質組分在沿色譜柱前進時沒有徑向擴散，這些都是不符合色譜柱實際情況的，因此塔板理論雖然能很好地解釋色譜峰的峰型、峰高，客觀地評價色譜柱地柱效，卻不能很好地解釋與動力學過程相關的一些現象，如色譜峰峰型的變形、理論塔板數與流動相流速的關系等。
[編輯]

基於動力學的Van Deemter方程

Van Deemter方程是對塔板理論的修正，用於解釋色譜峰擴張和柱效降低的原因。塔板理論從熱力學出發，引入了一些並不符合實際情況的假設，Van Deemter方程則建立了一套經驗方程來修正塔板理論的誤差。

Van Deemter方程將峰形的改變歸結為理論塔板高度的變化，理論塔板高度的變化則源於若干原因，包括渦流擴散、縱向擴散和傳質阻抗等。

由於色譜柱內固定相填充的不均勻性，同一個組分會沿著不同的路徑通過色譜柱，從而造成峰的擴張和柱效的降低。這稱作渦流擴散

縱向擴散是由濃度梯度引起的，組分集中在色譜柱的某個區域會在濃度梯度的驅動下沿著徑向發生擴散，使得峰形變寬柱效下降。

傳質阻抗本質上是由達到分配平衡的速率帶來的影響。實際體系中，組分分子在固定相和流動相之間達到平衡需要進行分子的吸附、脫附、溶解、擴散等過程，這種過程稱為傳質過程，阻礙這種過程的因素叫做傳質阻抗。在理想狀態中，色譜柱的傳質阻抗為零，則組分分子流動相和固定相之間會迅速達到平衡。在實際體系中傳質阻抗不為零，這導致色譜峰擴散，柱效下降。

在氣相色譜中Van Deemter方程形式為：

H=A+\frac{B}{\mu}+C\mu

其中H為塔板數，A為渦流擴散系數，B為縱向擴散系數，C為傳質阻抗系數，μ為流動相流速。

在高效液相色譜中，由於流動相粘度遠遠高於氣相色譜，縱向擴散對峰型的影響很小，可以忽略不計算，因而Van Deemter方程的形式為：

H = A + Cμ
[編輯]

基本技術和方法

色譜法常見的方法有：柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等

柱色譜法是最原始的色譜方法，這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中，將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端，以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種，一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫，一種是自下而上依靠毛細作用洗脫。收集分離後的純凈組分也有兩種不同的方法，一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一種方法是烘乾固定相後用機械方法分開各個色帶，以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子。柱色譜法被廣泛應用於混合物的分離，包括對有機合成產物、天然提取物以及生物大分子的分離。

薄層色譜法是應用非常廣泛的色譜方法，這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層，用毛細管、鋼筆或者其他工具將樣品點染於薄板一端，之後將點樣端浸入流動相中，依靠毛細作用令流動相溶劑沿薄板上行展開樣品。薄層色譜法成本低廉操作簡單，被用於對樣品的粗測、對有機合成反應進程的檢測等用途。

氣相色譜是機械化程度很高的色譜方法，氣相色譜系統由氣源、色譜柱和柱箱、檢測器和記錄器等部分組成。氣源負責提供色譜分析所需要的載氣，即流動相，載氣需要經過純化和恆壓的處理。氣相色譜的色譜柱一般直徑很細長度很長，根據結構可以分為填充柱和毛細管柱兩種，填充柱比較短粗，直徑在5毫米左右，長度在2－4米之間，外殼材質一般為不銹鋼，內部填充固定相填料；毛細管柱由玻璃或石英製成，內徑不超過0.5毫米，長度在數十米到一百米之間，柱內或者填充填料或者圖布液相的固定相。柱箱是保護色譜柱和控制柱溫度的裝置，在氣相色譜中，柱溫常常會對分離效果產生很大影響，程序性溫度控制常常是達到分離效果所必須的，因此柱箱扮演了非常重要的角色。檢測器是氣相色譜帶給色譜分析法的新裝置，在經典的柱色譜和薄層色譜中，對樣品的分離和檢測是分別進行的，而氣相色譜則實現了分離與檢測的結合，隨著技術的進步，氣相色譜的檢測器已經有超過30種不同的類型。記錄器是記錄色譜信號的裝置，早期的氣相色譜使用記錄紙和記錄器進行記錄，現在記錄工作都已經依靠計算機完成，並能對數據進行實時的化學計量學處理。氣相色譜被廣泛應用於小分子量復雜組分物質的定量分析。

高效液相色譜 (HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法，高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似於氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恆定平穩；進樣系統要求進樣便利切換嚴密；由於液體流動相粘度遠遠高於氣體，為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠小於氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
[編輯]

應用

色譜法的應用可以根據目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。

制備性色譜的目的是分離混合物，獲得一定數量的純凈組分，這包括對有機合成產物的純化、天然產物的分離純化以及去離子水的制備等。相對於色譜法出現之前的純化分離技術如重結晶，色譜法能夠在一步操作之內完成對混合物的分離，但是色譜法分離純化的產量有限，只適合於實驗室應用。

分析性色譜的目的是定量或者定性測定混合物中各組分的性質和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等，定量的分析性色譜有氣相色譜、高效液相色譜等。色譜法應用於分析領域使得分離和測定的過程合二為一，降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期，是目前比較主流的分析方法。在中華人民共和國葯典中，共有超過600種化學合成葯和超過400種中葯的質量控制應用了高效液相色譜的方法。
[編輯]

發展方向

色譜法是分析化學中應用最廣泛發展最迅速的研究領域，新技術新方法層出不窮。
[編輯]

新固定相的研究

固定相和流動相是色譜法的主角，新固定相的研究不斷擴展著色譜法的應用領域，如手性固定相使色譜法能夠分離和測定手性化合物；反相固定相沒有死吸附，可以簡單地分離和測定血漿等生物葯品。
[編輯]

檢測方法的研究

檢測方法也是色譜學研究的熱點之一，人們不斷更新檢測器的靈敏度，使色譜分析能夠更靈敏地進行分析。人們還將其他光譜的技術引入色譜，如進行色譜－質譜連用、色譜－紅外光譜連用、色譜－紫外連用等，在分離化合物的同時即行測定化合物的結構。色譜檢測器的發展還伴隨著數據處理技術的發展，檢測獲得的數據隨即進行計算處理，使試驗者獲得更多信息。
[編輯]

專家系統

專家系統是色譜學與信息技術結合的產物，由於應用色譜法進行分析要根據研究內容選擇不同的流動相、固定相、預處理方法以及其他條件，因此需要大量的實踐經驗，色譜專家系統是模擬色譜專家的思維方式為色譜使用者提供幫助的程序，專家系統的知識庫中存儲了大量色譜專家的實踐經驗，可以為使用者提供關於色譜柱系統選擇、樣品處理方式、色譜分離條件選擇、定性和定量結果解析等幫助。
[編輯]

色譜新方法

色譜新方法也是色譜研究熱點之一。高效毛細管電泳法是目前研究最多的色譜新方法，這種方法沒有流動相和固定相的區分，而是依靠外加電場的驅動令帶電離子在毛細管中沿電場方向移動，由於離子的帶電狀況、質量、形態等的差異使不同離子相互分離。高效毛細管電泳法沒有HPLC方法中存在的傳質阻抗、渦流擴散等降低柱效的因素，縱向擴散也因為毛細管壁的雙電層的存在而受到抑制，因而能夠達到很高的理論塔板數，有極好的分離效果。
[編輯]

參見

* 分析化學
* 高效液相色譜

取自"http://wikipedia.cnblog.org/wiki/%E8%89%B2%E8%B0%B1%E6%B3%95"

頁面分類: 新條目推薦 | 分析化學

⑻ 求樣品的色譜分析應用及發展趨勢的一篇論文謝謝

自己網路一下吧！

⑼ 求HPLC的論文！

這有篇，可以供樓主參考：

http://yxsyzx.jzmu.e.cn/SBWJ/Docs/10160_8_g/jxcg/10160_8_g_12.pdf